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        遺傳改造T細胞對三陰性乳腺癌特異靶向性的研究
         
             論文目錄
         
        摘要第3-6頁
        abstract第6-7頁
        第一章 文獻綜述第12-35頁
            1.1 三陰性乳腺癌第12-14頁
            1.2 三陰性乳腺癌的傳統治療第14-16頁
                1.2.1 外科手術治療第14-15頁
                1.2.2 放射治療第15頁
                1.2.3 化療第15-16頁
                1.2.4 靶向治療第16頁
            1.3 三陰性乳腺癌的免疫治療第16-34頁
                1.3.1 免疫系統與癌癥的關系第17-22頁
                1.3.2 腫瘤免疫治療第22-23頁
                1.3.3 三陰性乳腺癌的免疫治療進展第23-25頁
                1.3.4 三陰性乳腺癌的CAR T免疫治療第25-31頁
                1.3.5 PD-1 信號通路在免疫治療中的應用第31-34頁
            1.4 本實驗的研究假說第34-35頁
        第二章 Meso-CAR T細胞靶向三陰性乳腺癌細胞系BT549 特異細胞毒性功能研究第35-64頁
            2.1 引言第35頁
            2.2 實驗材料第35-36頁
                2.2.1 健康人外周血第35-36頁
                2.2.2 主要細胞第36頁
                2.2.3 主要抗體第36頁
            2.3 實驗方法第36-49頁
                2.3.1 細胞復蘇、培養、凍存實驗第36-39頁
                2.3.2 分子克隆實驗第39-41頁
                2.3.3 慢病毒包裝實驗第41-42頁
                2.3.4 穩定表達熒光素酶細胞系的構建第42-43頁
                2.3.5 單克隆細胞株的篩選第43頁
                2.3.6 細胞表面抗原Mesothelin的流式染色第43-44頁
                2.3.7 從外周血中分離外周血單核細胞第44頁
                2.3.8 從PBMC中分離CD4~+和CD8~+T 細胞第44-45頁
                2.3.9 HUMAN T-ACT CD3/CD28 磁珠刺激T細胞生長及慢病毒感染T細胞第45-46頁
                2.3.10 Meso-CAR T細胞的獲得第46頁
                2.3.11 Meso-CAR染色第46-47頁
                2.3.12 CAR-T細胞的功能檢測第47-49頁
            2.4 結果與分析第49-63頁
                2.4.1 三陰性乳腺癌細胞系的表面抗原鑒定第49-50頁
                2.4.2 以Mesothelin為靶點的CAR T細胞的構建第50-53頁
                2.4.3 Meso-CAR T細胞的體外功能檢測第53-63頁
            2.5 本章小結第63-64頁
        第三章 CRISPR/Cas9 技術下調CD4~+T細胞PD-1 的表達第64-76頁
            3.1 引言第64-66頁
            3.2 實驗材料第66-67頁
                3.2.1 健康人外周血第66頁
                3.2.2 主要細胞第66-67頁
                3.2.3 主要抗體第67頁
                3.2.4 主要引物第67頁
            3.3 實驗方法第67-69頁
                3.3.1 CRISPR/Cas9 相關sgRNA序列的設計以及敲除質粒的構建第67-68頁
                3.3.2 慢病毒包裝實驗第68頁
                3.3.3 細胞表面抗原PD-L1 的流式染色第68頁
                3.3.4 從外周血中分離外周血單核細胞第68頁
                3.3.5 從PBMC中分離CD4~+T 細胞第68頁
                3.3.6 CD3/CD28 磁珠刺激T細胞生長及慢病毒感染T細胞第68-69頁
                3.3.7 PD-1,CD25 在原代T細胞表面共表達情況的檢測第69頁
                3.3.8 利用CRISPR/Cas9 技術敲除PD-1 效率的檢測第69頁
            3.4 結果與分析第69-75頁
                3.4.1 三陰性乳腺癌細胞系表面抗原PD-L1 的鑒定第69-70頁
                3.4.2 靶向基因PD-1的CRISPR載體的構建第70-72頁
                3.4.3 PD-1,CD25在CD4~+T細胞表面共表達的情況第72-74頁
                3.4.4 帶有PD-1 靶向序列的CRISPR載體能夠降低PD-1 的表達第74-75頁
            3.5 本章小結第75-76頁
        第四章 討論第76-79頁
        第五章 展望第79-80頁
        附錄1 主要儀器設備第80-81頁
        附錄2 主要試劑盒第81-82頁
        附錄3 主要試劑第82-84頁
        附錄4 主要服務第84-85頁
        附錄5 主要試劑配制第85-87頁
        參考文獻第87-96頁
        致謝第96-98頁
        攻讀碩士學位期間已發表或錄用的論文和專利第98頁

         
         
        論文編號BS4380662,這篇論文共98
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