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        尼古丁通過Nme2介導的端粒縮短促進小鼠生精細胞凋亡
         
             論文目錄
         
        摘要第3-5頁
        ABSTRACT第5-6頁
        符號與縮寫第10-11頁
        第一章 緒論第11-19頁
            1.1 哺乳動物精子發生的生物學過程第11-14頁
            1.2 吸煙與男性生殖第14-15頁
            1.3 端粒與生殖第15-16頁
            1.4 NME2 蛋白與端粒酶結合影響其活性第16頁
            1.5 端粒長度及端粒酶活性檢測方法第16-19頁
        第二章 尼古丁對小鼠生精細胞凋亡和端粒長度的影響第19-29頁
            2.1 背景介紹第19-20頁
            2.2 實驗儀器第20頁
            2.3 實驗試劑第20頁
            2.4 試劑配制第20-21頁
            2.5 實驗方法第21-24頁
                2.5.1 尼古丁處理小鼠模型的建立第21頁
                2.5.2 小鼠睪丸樣品的收集第21頁
                2.5.3 小鼠精子樣品的收集第21-22頁
                2.5.4 飽和酚法提取基因組DNA第22頁
                2.5.5 小鼠睪丸切片制作第22頁
                2.5.6 TUNEL法檢驗小鼠睪丸切片中凋亡細胞第22-23頁
                2.5.7 Realtime-PCR法檢測端粒長度第23-24頁
                2.5.8 Realtime-PCR法檢測端粒酶活性第24頁
                2.5.9 數據統計第24頁
            2.6 實驗結果第24-27頁
                2.6.1 尼古丁處理使雄性小鼠小鼠生精細胞凋亡增加第24-26頁
                2.6.2 尼古丁對小鼠睪丸與精子端粒長度的影響第26-27頁
                2.6.3 尼古丁對小鼠睪丸端粒酶活性的影響第27頁
            2.7 結果討論第27-29頁
        第三章 尼古丁促進小鼠端粒凋亡的可能機制研究第29-54頁
            3.1 背景介紹第29頁
            3.2 實驗儀器第29-30頁
            3.3 實驗試劑第30-31頁
            3.4 試劑配制第31-33頁
            3.5 實驗方法第33-43頁
                3.5.1 TRIzol法提取RNA、DNA和蛋白質第33-34頁
                3.5.2 反轉錄第34-35頁
                3.5.3 從細胞中提取蛋白第35頁
                3.5.4免疫蛋白印跡(Western blot)實驗第35-37頁
                3.5.5亞硫酸氫鹽測序(BSP)實驗第37-38頁
                3.5.6 甲基化水平影響基因表達驗證第38頁
                3.5.7 Realtime-PCR法檢測端粒長度第38-40頁
                3.5.8 Realtime-PCR法檢測端粒酶活性第40頁
                3.5.9 小鼠Nme2 開放閱讀框的克隆第40-41頁
                3.5.10 小鼠Nme2 真核表達質粒的構建第41-42頁
                3.5.11 Nme2在Hela細胞中誘導表達第42頁
                3.5.12 尼古丁處理Hela細胞模型的構建第42頁
                3.5.13 TUNEL法檢驗爬片細胞凋亡情況第42-43頁
            3.6 實驗結果第43-51頁
                3.6.1第43頁
                3.6.2 實驗目標基因篩選第43-44頁
                3.6.3 尼古丁對小鼠睪丸中Nme2 基因表達情況的影響第44頁
                3.6.4 尼古丁對Nme2 基因啟動子甲基化情況的影響第44-45頁
                3.6.5 Nme2 基因啟動子甲基化情況對表達影響的驗證第45-46頁
                3.6.6 Nme2 過表達體系鑒定第46-47頁
                3.6.7 NME2 蛋白過量表達及尼古丁處理細胞中端粒酶活性降低第47-48頁
                3.6.8 NME2 蛋白過量表達及尼古丁處理細胞中端粒長度縮短第48-49頁
                3.6.9 NME2 蛋白過量表達及尼古丁處理促進細胞凋亡第49-51頁
            3.7 結果討論第51-54頁
                3.7.1 尼古丁促使小鼠睪丸中Nme2 基因表達第51頁
                3.7.2 NME2 蛋白過表達和尼古丁處理能在細胞內影響端粒酶活性和端粒長度第51-52頁
                3.7.3 NME2 蛋白過表達和尼古丁處理能促進Hela細胞凋亡第52-54頁
        第四章 總結與展望第54-56頁
        參考文獻第56-61頁
        致謝第61-63頁
        攻讀碩士學位期間已發表或錄用的論文第63頁

         
         
        論文編號BS4380670,這篇論文共63
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